De Uitrusting van de Furaltadone (AMOZ) ELISA Test voor de Garnalen/het Vlees/Hepar van de Opsporingshoning

Furaltadone (AMOZ) ELISA Test Kit

Productomschrijving

REAGEN-^{™Furaltadone} (AMOZ) ELISA Test Kit verstrekt concurrerende enzymimmunoassay voor de kwantitatieve analyse van furaltadone in vissen, garnalen, vlees (kip, rundvlees, varkensvlees en hepar), eieren, slijpsteen.

• Snelle (4 uren), hoge terugwinning (80 - 105%), en rendabele extractiemethodes voor diverse steekproeven.

• Hoge gevoeligheid (0,05 ng/g of ppb) en lage opsporingsgrens (0,1 ng/g of ppb) voor diverse steekproeven.

• Hoge reproduceerbaarheid.

• Een snelle ELISA-analyse (uren minder dan 1 ongeacht aantal steekproeven).

Procedureoverzicht

De methode is gebaseerd op een concurrerende colorimetrische ELISA-analyse. Amoz-BSA is met een laag bedekt in de plaatputten. Tijdens de analyse, worden de steekproef en het AMOZ-antilichaam toegevoegd samen met secundair die antilichaam, met een peroxidaseenzym wordt geëtiketteerd. Als het AMOZ-residu in de steekproef aanwezig is, zal het voor het AMOZ-antilichaam concurreren, daardoor verhinderend het antilichaam aan amoz-BSA te binden in bijlage aan de put. De resulterende kleurenintensiteit, na toevoeging van het HRP-substraat (TMB), heeft een omgekeerde verhouding met de AMOZ-residuconcentratie in de steekproef.

Kit Contents, Opslag en Houdbaarheid

REAGEN-^{™Furaltadone} (AMOZ) ELISA Test Kit heeft de capaciteit voor 96 bepalingen of het testen in tweevoud van 42 steekproeven (veronderstellend 12 putten voor normen). Keer om het even welke ongebruikte die microwells naar de foliezak terug en verzegel hen met het deshydratiemiddel opnieuw in het originele pakket wordt verstrekt. Sla de uitrusting bij 2-8°C* op. De houdbaarheid is 12 maanden wanneer de uitrusting behoorlijk wordt opgeslagen.

* Als u niet van plan bent om de uitrusting meer dan 1 maand te gebruiken, sla Antibody#1 en HRP-Vervoegd Antilichaam #2 bij -20°C of in een diepvriezer op.

Gevoeligheid (Opsporingsgrens)

Specificiteit (Cross-Reactivity)

Vereiste die Materialen niet van de Uitrusting worden voorzien

1.Microtiter plaatlezer (450 NM)

2.Incubator

3.Tissue mixer (b.v. de Homogenisator van Omni TissueMaster)

4.Rotary evaporator of stikstofgas

5.Vortex mixer (b.v. Gneie-Draaikolkmixer van VWR)

6.10, 20, 100 en 1000 ml-pipetten

7.Multi-kanaal pipet: 50-300 (Facultatieve) ml

8.Ethyl acetaat

9.0.1 M K2HPO4

10.n-hexaan (of n-heptaan)

11.1M NaOH

12.1M HCL

Waarschuwingen en Voorzorgsmaatregelen

• De normen bevatten Furaltadone. Handvat met bijzondere zorg.

• Gebruik niet de uitrusting voorbij de vervaldatum.

• Vermeng reagentia van verschillende uitrustingen of geen partijen behalve componenten met hetzelfde artikelnummer binnen hun vervaldata. DE ANTILICHAMEN EN DE PLATEN ZIJN UITRUSTING EN PARTIJ-SPECIFIEK.

• Probeer om een laboratoriumtemperatuur van 20°-25°C (68°-77°F) te handhaven. Vermijd lopend analyses onder of dichtbij luchtopeningen, aangezien dit het bovenmatige koelen, het verwarmen en/of verdamping kan veroorzaken. Ook, stel geen analyses in direct zonlicht in werking, aangezien dit bovenmatige hitte en verdamping kan veroorzaken. De koude bankbovenkanten zouden moeten worden vermeden door verscheidene lagen van keukenrol of wat ander isolatiemateriaal onder de analyseplaten tijdens incubatie te plaatsen.

• Zorg ervoor u slechts gedistilleerd of gedeioniseerd water gebruikt aangezien de waterkwaliteit zeer belangrijk is.

• Wanneer het pipetting van steekproeven of reagentia in een lege microtiter plaat, plaats de pipetuiteinden goed in de lagere hoek van, opnemend contact met het plastiek.

• De incubaties van analyseplaten vastgesteld zo nauwkeurig mogelijk moeten zouden zijn. Verenigbaar ben wanneer het toevoegen van normen aan de analyseplaat. Voeg eerst uw normen toe en dan uw steekproeven.

• Voeg normen aan plaat slechts in de orde van lage concentratie aan hoge concentratie toe aangezien dit het risico zal minimaliseren om de standaardkromme te compromitteren.

• Koel altijd platen in verzegelde zakken met een deshydratiemiddel om stabiliteit te handhaven. Verhinder condensatie op platen zich te vormen door hen toe te staan in evenwicht brengen aan kamertemperatuur (20 – 25°C/68 – 77°F) terwijl in de verpakking.

STEEKPROEFvoorbereiding

Zeker ben de steekproeven behoorlijk worden opgeslagen. In het algemeen, zouden de steekproeven bij forno moeten worden gekoeld 2-4°C meer dan 1-2 dagen. Vorststeekproeven aan een minimum van -20°C als zij voor een langere periode moeten worden opgeslagen. De bevroren steekproeven kunnen bij ruimte temps (20 – 25°C/68 – 77°F) of in een ijskast v3o3or gebruik worden ontdooid.

Vissen

• Mengeling 1 g van de gehomogeniseerde steekproef met 0,5 ml van 1X-de Buffer van de Steekproefextractie, 3,5 ml gedistilleerd water, 0,5 ml van 1 M HCl en 20 ml van 50 mm 2-Nitrobenzaldehyde door 30 seconden vortexing.

• Broed bij 50°C -55°C uit 3 uren. Draaikolk de steekproef 5 seconden elk uur tijdens de incubatie.

• Voeg 5 ml van 0,1 M K2HPO4, 0,4 ml 1 m-NaOH en 6 ml ethylacetaat, draaikolk 2 minuten toe.

• Centrifugeer bij 4.000 x g 5 minuten bij kamertemperatuur (20 – 25°C).

• Overdracht 3 ml van de ethylacetaatbovendrijvende substantie die (aan 0,5 g van de originele steekproef beantwoorden) in een nieuw flesje (F vermijdt de lagere waterige laag! Indien vervuild met lagere laag, centrifugeer opnieuw de gehaalde ethylacetaat 5 minuten bij 4.000 x g en krijg de hogere organische laag). Voor het geval dat de emulsie gebeurde en de hogere ethylacetaatlaag minder dan 3 ml was, broed de steekproef in water - bad 3 minuten bij 85°C.Use uit een roterende evaporator om de steekproef in een 60-70°C-water te drogen - bad onder verminderde druk. Alternatief, kan de steekproef droog zijn door stikstofgas in een 60-70°C-water te blazen - bad.

• Los het droge residu in 1 ml van n-hexane (of n-heptaan op).

• Voeg 1 ml van 1X-Buffer van de Steekproefextractie, draaikolk de steekproef 2 minuten toe.

• Centrifugeer de steekproef bij 4.000 x g 10 minuten bij kamertemperatuur (20 – 25°C/68 – 77°F).

• Gebruik 50mL van de lagere waterige laag per goed voor de analyse.

Nota: Verdunningsfactor: 2. Om hoge achtergrond te vermijden, adviseert men dat een oplosbare lege steekproef, om te beginnen met de vermindering van 3 ml ethylacetaat tot ze droog zijn tegelijkertijd wordt voorbereid en met de rust extractieprocedure verdergaat. Trek het resultaat van de oplosbare controle van de steekproefresultaten af.

Garnalen /Meat/Hepar

• Mengeling 1 g van de gehomogeniseerde steekproef met de Buffer van de de Steekproefextractie van 0,5 ml 1X, 3,5 ml gedistilleerd water, 0,5 ml van 1 M HCl en 20 ml van 50 mm 2-Nitrobenzaldehyde door 30 seconden vortexing.

• Broed at50°C -55°C 3 uren uit. Draaikolk de steekproef 5 seconden elk uur tijdens de incubatie.

• Voeg 5 ml van 0,1 M K2HPO4, 0,4 ml 1 m-NaOH en 6 ml ethylacetaat, draaikolk 5 minuten toe.

• Centrifugeer bij 4.000 x g 5 minuten bij kamertemperatuur (20 – 25°C/68 – 77°F).

• Overdracht 3,0 ml van de ethylacetaatbovendrijvende substantie die (aan 0,5 g van de originele eisteekproef beantwoorden) in een nieuw flesje (F vermijdt de lagere waterige laag! Indien vervuild met lagere laag, centrifugeer opnieuw de gehaalde ethylacetaat 5 minuten bij 4.000 x g en krijg de hogere organische laag). Gebruik een roterende evaporator om de steekproef in een 60-70°C-water onder verminderde druk te drogen - bad. Alternatief, kan de steekproef droog zijn door stikstofgas in een 60-70°C-water te blazen - bad.

• Los het droge residu in 1 ml van n-hexane (of n-heptaan op).

• Voeg 1 ml 1X-de Buffer en de draaikolk van de Steekproefextractie de steekproef 2 minuten toe.

• Centrifugeer de steekproef bij 4.000 x g 10 minuten bij kamertemperatuur (20 – 25°C/68 – 77°F).

• Gebruik 50 ml van de lagere waterige laag per goed voor de analyse.

Nota: Verdunningsfactor: 2. Om hoge achtergrond te vermijden, adviseert men dat een oplosbare lege steekproef, om te beginnen met de vermindering van 3 ml ethylacetaat tot ze droog zijn tegelijkertijd wordt voorbereid en met de rust procedure verdergaat. Trek het resultaat van de oplosbare controle van de steekproefresultaten af.

Ei

• Mengeling 1 g van de eisteekproef met 0,5 ml van 1X-de Buffer van de Steekproefextractie, 3,5 ml gedistilleerd water, 0,5 ml van 1 M HCl en 20 ml van 50 mm 2-Nitrobenzaldehyde door 2 minuten vortexing.

• Broed bij 50°C -55°C uit 3 uren. Draaikolk de steekproef 5 seconden elk uur tijdens de incubatie.

• Voeg 5mL van 0,1 M K2HPO4, 0,4 ml 1 m-NaOH en 6 ml ethylacetaat, draaikolk 5 toe minuten bij maximum snelheid.

• Centrifugeer bij 4.000 x g 10 minuten bij kamertemperatuur (20 – 25°C/68 – 77°F).

• Overdracht 3,0 ml van de ethylacetaatbovendrijvende substantie die (aan 0,5 g van de originele honingssteekproef beantwoorden) in een nieuw flesje (F vermijdt de lagere waterige laag! Indien vervuild met lagere laag, centrifugeer opnieuw de gehaalde ethylacetaat 5 minuten bij 4.000 x g en krijg de hogere organische laag). Gebruik een roterende evaporator om de steekproef in een 60-70°C-water onder verminderde druk te drogen - bad. Alternatief, kan de steekproef droog zijn door stikstofgas in een 60-70°C-water te blazen - bad.

• Los het droge residu in 1 ml van n-hexane (of n-heptaan op).

• Voeg 1 ml 1X-Buffer en draaikolk van de Steekproefextractie 2 minuten toe.

• Centrifugeer de steekproef bij 4.000 x g 10 minuten bij kamertemperatuur (20 – 25°C/68 – 77°F).

• Use50 ml van de lagere waterige laag voor de analyse.

Nota: Verdunningsfactor: 2. (1) na verdamping van het ethylacetaatuittreksel, wordt het resulterende residu niet volledig opgelost. Nochtans, zal het terugwinningstarief niet gecompromitteerd worden (>80%). (2) voor deze voorbereiding, adviseren wij gebruikend norm 0,5 ng/g of ppb als afgesneden waarde voor positieve steekproeven aangezien de negatieve steekproeven aanzienlijke gevolgen als achtergrond konden tonen (in sommige gevallen tussen normen 0,05 ng/g en 0,15 ng/g).