Het Streptomycine ™ ELISA Test Kit van REAGEN is concurrerende enzymimmunoassay voor de kwantitatieve analyse van streptomycine en dihydrostreptomycin in voer, honing, nier, lever, vlees (rundvlees, kip en varkensvlees), melk, serum en urine.
Steekproeftype |
Opsporingsgrens (ng/g of ppb) |
Voer |
5 |
Honing |
2 |
Vlees/Lever/Nier |
5 |
Melk |
1 |
Melkpoeder |
1 |
Serum/Urine |
0,5 |
Analytes |
Cross-reactivity (%) |
Streptomycine |
100 |
Snelle (10 - 30 minuten), en organische reagens-vrije extractiemethodes voor diverse steekproeven met hoge terugwinning (75 - 115%).
Hoge gevoeligheid (0,05 ng/g of ppb) en lage opsporingsgrens (1 ng/g of ppb voor vlees en melk).
Hoge reproduceerbaarheid.
Een snelle ELISA-analyse (minder dan 2 uren ongeacht aantal steekproeven).
De methode is gebaseerd op een concurrerende colorimetrische ELISA-analyse. Het streptomycineantilichaam is met een laag bedekt in de plaatputten. Tijdens de analyse, wordt de steekproef toegevoegd samen met de streptomycine-mierikswortel peroxidasestamverwant. Als het streptomycineresidu in de steekproef aanwezig is, zal het voor het streptomycineantilichaam concurreren, daardoor verhinderend streptomycine-HRP aan het antilichaam te binden in bijlage aan de put. De resulterende kleurenintensiteit, na toevoeging van het HRP-substraat (TMB), heeft een omgekeerde verhouding met de concentratie van het streptomycineresidu in de steekproef.
Etiketteer de individuele stroken die en gedeeltereagentia als volgend voorbeeld zullen worden gebruikt:
Component |
Volume per Reactie |
24 reacties |
Streptomycineantilichaam #1 |
50 ml |
1,2 ml |
HRP-vervoegd Antilichaam #2 |
50 ml |
1,2 ml |
1X wasoplossing |
2,0 ml |
48 ml |
Eindebuffer |
100 ml |
2,4 ml |
TMB-Substraat |
100 ml |
2,4 ml |
Voeg 50uL in tweevoud van elk Streptomycinenormen in verschillende putten (F voegt normen aan plaat slechts in de orde van lage concentratie aan hoge concentratie toe) toe.
Voeg uL 50 in tweevoud van elke steekproef in verschillende steekproefputten toe.
Voeg uL 50 van HRP-Vervoegd Antilichaam #2 en 50mL-Antilichaam #1 goed aan elk toe, mengeling goed door de plaat 1 minuut manueel zacht te schommelen.
Broed de plaat 30 minuten uit bij kamertemperatuur (20 – 25°C/68 – 77°F) ( F vermijdt direct zonlicht en koude bankbovenkanten tijdens de incubatie. Het behandelen van de microtiter plaat terwijl het uitbroeden wordt geadviseerd).
Was de plaat 5 keer met uL 250 van 1X-Wasoplossing. Na de laatste was, keer de plaat om en onttrek zacht de plaat droog op keukenrollen (F voert de volgende stap onmiddellijk na plaatwassen uit. Sta niet de plaat toe om tussen werkende stappen) aan de lucht te drogen.
Voeg uL 100 van TMB-substraat toe. Tijd de reactie onmiddellijk na het toevoegen van het substraat. Meng de oplossing door de plaat 1 minuut manueel zacht te schommelen terwijl het uitbroeden ( F zette geen substraat terug naar de originele container om eender welke potentiële verontreiniging te vermijden. Om het even welke substraatoplossing die kleuring tentoonstellen is indicatief van verslechtering en zou moeten worden verworpen. Het behandelen van de microtiter plaat terwijl het uitbroeden wordt geadviseerd).
Na het uitbroeden 15 minuten bij kamertemperatuur (20 – 25°C/68 – 77°F), voeg uL 100 van Eindebuffer toe om de enzymreactie tegen te houden.
Lees zo spoedig mogelijk de plaat na de toevoeging van Eindebuffer op een plaatlezer met 450 NM-golflengte (F vóór het lezen, gebruikt lint-free afveegt op de bodem van de plaat om geen vochtigheid te verzekeren of de vingerafdrukken mengen zich in de lezingen).
Contacteer op elk ogenblik ons